液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。

高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。

它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)；又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)；也稱現(xiàn)代液相色譜。

Analytical Scientist曾評出HPLC歷創(chuàng)新技術(shù)，分別是：

1. 臺商用HPLC系統(tǒng)LCS-1000，1967年由PickerNuclear推出。

2. 6通進樣閥，1968年由Valco推出。它取消了隔墊進樣器和停流技術(shù)，采用高壓進樣，改善了保留時間、重現(xiàn)性、自動化和定量性能。

3. 模塊化組件，1968年由LDC/MiltonRoy推出。獨立的254紫外檢測器、LDC RI檢測器和Milton Roy微型泵等組件迅速應(yīng)用于模塊化色譜儀。批儀器是集成的，所有內(nèi)部部件都在一個盒子里。模塊化市場的興起使研究人員能夠獲得組件(例如：泵、進樣器、柱架/柱溫箱、檢測器)。LDC是提供價格合理且功能強大模塊的組件公司。

4(1). Autolab System IV計算積分器，1969年由Autolab推出。臺色譜自動積分器用內(nèi)置的機械集成取代了切割稱重、求積儀和記錄儀。該數(shù)據(jù)系統(tǒng)用于GC，并適用于LC。功能包括切線峰檢測、基線校正和峰面積歸一化，并允許使用響應(yīng)因子和內(nèi)標(biāo)。Autolab于1969年被SpectraPhysics收購。

4(2). M-6000液相泵，1972年由Waters推出(與積分器排名并列)。臺專為HPLC設(shè)計的泵，主要特點：雙往復(fù)式，不需要脈沖阻尼器，耐壓6000 psi，和一個低容量室。

5. 708AL型自動進樣器，1974年由Micromeritics推出。臺高效液相色譜自動進樣器，提高了樣品通量和定量能力。后來的產(chǎn)品在該單元上進行了改進。

6. 惠普1084型集成型HPLC，1976年由惠普公司推出。具有自動進樣、流量控制、紫外檢測器控制、記錄和報告功能；是一臺帶有數(shù)字處理器控制的液相色譜儀，帶有內(nèi)置鍵盤和按鈕控制。多年來，它成為質(zhì)量和性能的黃金標(biāo)準(zhǔn)。

7. 8450型二極管陣列檢測器(DAD)，1977年由惠普公司推出。色譜過程中進行動態(tài)紫外-可見光譜分析時，DAD具有優(yōu)異的信噪比性能；與停流光譜掃描相比，生產(chǎn)率提高。其他公司很快也推出了自己的DAD檢測器。

8. 傳送帶式LC-MS接口，1976年由FinniganMAT推出。Finnigan MAT(被賽默飛收購)的McFadden、Schwartz和Bradford研制了傳送帶式接口(moving-belt interface)；盡管有一些缺點，但傳送帶接口是真正的色譜接口，是市場上個成功的LC-MS接口，是許多方法中，直到電噴霧(ESI)出現(xiàn)。

9. 帶電氣溶膠探測器(CAD)，2005年由ESABioscience推出。CAD有時被稱為“窮人的質(zhì)譜儀”，是一種通用檢測器。它的靈敏度比RI檢測器(也是一種通用探測器)高得多，至今仍在廣泛使用。

10. Acquity UPLC，2004年由Waters推出。為了引入亞2微米顆粒，需要新的高壓儀器。Waters Acquity UPLC系統(tǒng)是個設(shè)計用于滿足壓力輸出為12,000 psi的新型小顆粒色譜柱需求的系統(tǒng)。除此之外，Acquity還具有更低的額外柱效應(yīng)和其它改進。

雖未上榜創(chuàng)新技術(shù)，但以下研發(fā)具有里程碑意義，分別是：

1967年，Waters推出ALC-100。

1969年，杜邦推出820型集成系統(tǒng)。

1973年，Waters專為HPLC研制推出U6K進樣器，旁通的Loop防止柱沖擊，耐壓6000psi，可變進樣體積。

1976年，Rheodyne 推出7125閥，進樣針可注射到閥中心，該技術(shù)后非常流行，并OEM給許多儀器公司。

1972年，Cecil儀器公司推出CE212，款獨立的可變波長檢測器，帶停流掃描。

1970年，瓦里安推出4100/4200注射泵，采用新的原理，是個用于高壓操作和無脈沖流動的注射泵，此后成功用于8500型HPLC。等度泵(4100型)的流速穩(wěn)定，而梯度泵(4200型)的溶劑體積可壓縮性，影響了流量和溶劑組成的重現(xiàn)性。

1976年，Altex推出110泵，是價格合理的獨立往復(fù)泵，通過可變活塞速度優(yōu)化占空比，降低流量脈動。110泵提供了更流暢的液流、改善的基線和定量性能，并為未來的泵開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。

1974年，惠普推出HP 3380A數(shù)字積分器，是微處理器控制的積分器，帶有圖表記錄器和字母數(shù)字打印機繪圖儀，一張紙上給出所有計算數(shù)據(jù)。

1979年，Nelson Analytical推出用于液相色譜儀的PC軟件。將PC用作峰值積分、定量和儀器控制的驅(qū)動程序，并OEM給許多制造商。在Nelson SW之后，幾乎所有儀器都使用PC來控制硬件和處理數(shù)據(jù)；獨立計算集成商迅速死亡(該公司于1989年被PerkinElmer收購)。

1977年，瓦里安推出LC 5000液相色譜儀。LC 5000采用一種全新的集成系統(tǒng)方法。該泵設(shè)計用于在一個泵頭中低壓混合三種溶劑，系統(tǒng)有自己的CRT顯示器和鍵盤，可以并排安裝檢測器，除數(shù)據(jù)系統(tǒng)(外部)外，LC的各個方面都由微處理器處理。LC 5000為后來大多數(shù)液相色譜儀提供了遵循的平臺。

1975年，戴安Dionex推出Model 10離子色譜儀。Durruminstruments從陶氏化學(xué)獲得了，并成立了一個單獨的部門(Dionex)開發(fā)一種產(chǎn)品，通過使用抑制柱的電導(dǎo)檢測來分離離子化合物，以去除流動相中的鹽并降低背景電導(dǎo)率。Dionex成為了這項技術(shù)的，至今仍保持(后被賽默飛收購)。

1987年，Vestec公司推出熱噴霧LC-MS接口。EI型碎裂有時被認為是質(zhì)子化或去質(zhì)子化分子的顯著碎裂。在有限的LC條件范圍內(nèi)，非揮發(fā)性分析物的靈敏度較低。直到20世紀(jì)90年代，熱噴霧成為主要的LC/MS接口，主要是由于其觀察到EI型碎裂。

1989年，SCIEX推出電噴霧(離子噴霧)LC-MS接口。耶魯大學(xué)的JohnFenn開發(fā)了電噴霧(ESI)源，可產(chǎn)生完整、高分子量、多重質(zhì)子化或去質(zhì)子化的離子，他因此獲得2002年Nobel化學(xué)獎，其獲獎演講題為《當(dāng)大象飛翔》。Fenn觀察到ESI靈敏度與分析物濃度有關(guān)，毛細管柱的洗脫峰明顯比大口徑柱的洗脫峰更尖銳，從而在較低的進樣量下大大提高了靈敏度?，F(xiàn)在，ESI是標(biāo)準(zhǔn)LC-MS接口。Henion等人開發(fā)了離子噴霧接口，使用霧化氮氣輔助電噴霧操作；SCIEX使用了Henion，是個銷售該產(chǎn)品的公司。

展望未來50年，，在未來HPLC領(lǐng)域發(fā)展的幾大趨勢：

? 小型化

短期內(nèi)希望出現(xiàn)小型化、易于更換的單片或立柱集成到手持式或口袋大小的電池供電LC系統(tǒng)中，無需端部接頭(fitting)，不增加死體積。從長遠來看，將出現(xiàn)小型化的個人分離系統(tǒng)，集成組件和靈敏、選擇性的通用檢測，能夠?qū)崟r分析個人的健康狀況。LC與腕表配置的離子遷移譜儀耦合，腕表周長提供漂移管的尺寸。應(yīng)用包括：健康檢查或銷售網(wǎng)點的新鮮度指標(biāo)和鑒別。

? 智能化

智能、自動化儀器，只需一個按鈕就可執(zhí)行分析；非專業(yè)用戶無需更換色譜柱、開發(fā)方法或進行定量分析。就像自動駕駛汽車一樣，將人工智能結(jié)合于液相色譜中。

? 專用化

集成樣品制備的專用分析儀，樣品可以放置在卡片或手指上，插入儀器，在不到1分鐘內(nèi)完成完整的分析(例如藥物篩選)。此外，廉價的連續(xù)/定期監(jiān)測LC設(shè)備，能夠在故障發(fā)生之前預(yù)測故障。

? 多維液相

希望短期內(nèi)出現(xiàn)實用的多維液相色譜系統(tǒng)，解決目前的定量問題。從長遠來看，智能、自動儀器不需要非熟練用戶更換色譜柱、開發(fā)方法或進行定量分析。

高效液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20% ，而80% 則需用高效液相色譜來分析。

HPLC因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點且不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床分析，世界各國己將該法收載于藥典。