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在核酸實(shí)驗(yàn)中紫外交聯(lián)儀常用于烘烤,其效率比傳統(tǒng)的烘烤法高出5-10倍,也是的實(shí)驗(yàn)器材,下面將為您詳細(xì)介紹紫外交聯(lián)儀。
紫外交聯(lián)儀簡(jiǎn)介
由于紫外交聯(lián)儀配置了一種紫外能量程序設(shè)計(jì)系統(tǒng)(Joules/c㎡),即其中的時(shí)間積分儀連續(xù)檢測(cè)紫外光的照射。紫外交聯(lián)試驗(yàn)主要用來(lái)篩選特性蛋白,主要應(yīng)用于生物學(xué)等領(lǐng)域。
紫外交聯(lián)儀工作原理
以聚烯烴為主要原料摻入適量的光引發(fā)劑,用紫外光照射,通過(guò)光引發(fā)劑吸收特定波長(zhǎng)的紫外光引發(fā)產(chǎn)生聚烯烴自由基,從而發(fā)生一系列快速聚合反應(yīng),生成具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的交聯(lián)聚烯烴。
紫外交聯(lián)儀的應(yīng)用
紫外交聯(lián)儀是一種多用途的254mn紫外輻射系統(tǒng),主要用于將核酸交聯(lián)于膜上。還可用于瓊脂糖凝膠中DNA的切割、RecA突變篩選、嘧啶二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化、UV滅菌消除PCR污染等。在紫外滅菌、聚合物紫外處理等方面也有應(yīng)用。創(chuàng)建卵裂抑制胸腺嘧啶二聚體的基因定位,測(cè)試RecA的功能
紫外交聯(lián)儀特點(diǎn)
1.硬件特點(diǎn)
1.可觸摸鍵盤(pán)。
2.漢化液晶屏顯示。
3.大型不銹鋼紫外曝光室。
2.軟件特點(diǎn)
1.關(guān)機(jī)信息不丟失。
2.具有曝光能量手動(dòng)設(shè)置功能。
3.具有曝光時(shí)間手動(dòng)設(shè)置功能。
4.紫外交聯(lián)儀具有能量吸收值達(dá)到設(shè)定值時(shí),照射將自動(dòng)停止功能。
5.紫外光源強(qiáng)弱與否、時(shí)間差異與否,照射循環(huán)均都有很好的重復(fù)性。
6.紫外照射可使雜交信號(hào)比傳統(tǒng)烘烤法提高5-10倍。
紫外交聯(lián)儀操作說(shuō)明
1.開(kāi)啟前
將紫外交聯(lián)儀設(shè)備水平放在工作臺(tái)上。
在開(kāi)門(mén)時(shí)確保有足夠的空間
2.操作步驟
插入電源線的母頭到交聯(lián)劑。
插頭插入正確接地的電源插座中。(交聯(lián)劑的正確的工作電壓是產(chǎn)品信息的標(biāo)簽上找到)。
打開(kāi)ON / OFF開(kāi)關(guān)到ON的位置。
預(yù)設(shè)能量和時(shí)間:按PRESET(預(yù)調(diào)設(shè)置)→ENERGY(能量),輸入所需的能量級(jí),再按ENTER(進(jìn)入)即完成能量設(shè)定;按PRESET(預(yù)調(diào)設(shè)置)→TIME(時(shí)間),輸入所需的時(shí)間,再按ENTER(進(jìn)入)即完成時(shí)間設(shè)定。按PRESET(預(yù)調(diào)設(shè)置)→wavelength(波長(zhǎng))再按ENTER(進(jìn)入)即完成波長(zhǎng)設(shè)定。注:每次設(shè)定波長(zhǎng)之前要換上相應(yīng)的號(hào)燈管。然后按START鍵開(kāi)始工作。
紫外交聯(lián)儀日常使用時(shí)條件
1.環(huán)境溫度:5-35℃
2.相對(duì)濕度:≤80%
3.經(jīng)常用軟布或海綿清潔內(nèi)室
4.保持紫外曝光室內(nèi)干燥清潔。
5.搬運(yùn)時(shí)包裝應(yīng)由防塵、減震物品、紙箱由里到外順序組成。
6.運(yùn)輸過(guò)程中防止沖擊、劇烈震動(dòng)、潮濕。
7.更換不同波長(zhǎng)的燈管及使用的燈管損壞時(shí),需要更換燈管。更換方法:把燈管向下拉出燈架,再將燈管兩端的插腳從軟連接插座中拔出;將新管裝入軟連接插座,再將燈管向上輕輕的推入燈架,更換完畢。
紫外交聯(lián)儀使用注意事項(xiàng)
1.不能在內(nèi)室表面殘留化學(xué)試劑;
2.絕不能使用清潔器清理內(nèi)室;
絕不能使用丙酮或**清潔內(nèi)室。
更換保險(xiǎn)絲時(shí)一定要先斷掉儀器電源,打開(kāi)保險(xiǎn)絲管座的蓋,更換相應(yīng)容量的保險(xiǎn)絲,再蓋緊。
如何正確理解紫外交聯(lián)儀中三種波長(zhǎng)UVA(365)、UVB(302)、UVC(254)
紫外線是指通過(guò)棱鏡將自然光分成赤、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫七色光,波長(zhǎng)較紫色光更短的一類(lèi)光線的總稱(chēng).它廣泛存在于自然界中,與人的生活密切相關(guān)。根據(jù)生物效應(yīng)的不同, 將紫外線按照波長(zhǎng)劃分為四個(gè)部分:A波段(UVA),又稱(chēng)為黑斑效應(yīng)紫外線(400~315nm);B 波段(UVB ) , 又稱(chēng)為紅斑效應(yīng)紫外線( 3 15~280nm);C 波段(UVC),又稱(chēng)為滅菌紫外線(280~100nm);D 波段(UVD),又稱(chēng)為真空紫外線(Vacuume UV)(200~10nm)。
析浦科學(xué)儀器相關(guān)紫外產(chǎn)品,很多年之前,紫外線就已被用于防止物體表面微生物的生長(zhǎng),空氣中微生物的破壞以及液體滅菌,紫外線殺菌消毒技術(shù)具有廣譜高效、無(wú)二次污染、不存在抗藥性、便于管理和實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等諸多優(yōu)點(diǎn),多年來(lái)被廣泛運(yùn)用于物體表面、空氣、飲用水的消毒和廢水處理。以C 波段為主紫外線可以殺滅包括細(xì)菌繁殖體、芽胞、分支桿菌、病毒、真菌、立克次體和支原體等各種微生物。殺菌效果是由微生物所接受的紫外線輻照劑量決定的,不同種類(lèi)的微生物對(duì)紫外線的敏感性不同,因此使用紫外線消毒時(shí),必須確定合適的輻照劑量以達(dá)到滅殺目標(biāo)微生物的效果。少了殺滅效率低,高了造成燈的不應(yīng)有冗余。如今紫外線殺菌也應(yīng)用到了手術(shù)室,開(kāi)始對(duì)空氣進(jìn)行消毒殺菌,上述應(yīng)用都應(yīng)用到了人們的日常生活中。科研工作者不斷的研究與深入,慢慢將紫外線殺菌的這種特性應(yīng)用到生命科學(xué)的研究中。目前析浦科學(xué)儀器有限公司,使用UVA(365nm)、UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三種波長(zhǎng)制造了三款紫外交聯(lián)儀,主要包括xepu-1208A(365nm)、xepu-1208B(302nm)、xepu-1208C(254nm)滿足不同的科研需求。如今基因組學(xué)蛋白組學(xué)走在時(shí)代的前沿,分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)得到了質(zhì)的飛躍,離不開(kāi)人們對(duì)未知科學(xué)的探索,在分子水平上,在紫外線照射下,核酸鏈中相鄰的嘧啶可發(fā)生二聚化,主要發(fā)生在胸腺嘧啶堿基之間。 近一百年來(lái),研究人員一直利用紫外線的這種特性作為研究基因突變的工具。總而言之,這些發(fā)現(xiàn)為分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)以及其它領(lǐng)域中基于紫外線的應(yīng)用鋪平了道路。
紫外交聯(lián)儀是一種多用途的紫外輻射系統(tǒng),主要用于將DNA或RNA交聯(lián)到尼龍膜、硝酸纖維素膜上。交聯(lián)過(guò)程僅需25–50秒。傳統(tǒng)的方法是將膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小時(shí)。與真空烘箱烘焙相比,紫外交聯(lián)儀照射可使雜交信號(hào)顯著增加。此外XEPU系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯(lián),CLIP-seq、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq、pBpa、sulfo-SDA、psoralen等雙分子交聯(lián)以及微生物滅活(例如細(xì)菌,真菌,病毒),光穩(wěn)定性驗(yàn)證,瓊脂凝膠中DNA的切割,RecA突變篩選,胸腺二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化,UV滅菌消除PCR污染。在紫外滅菌,聚合物固化(例如水凝膠,甲基丙烯酸甲酯樹(shù)脂)等方面也有應(yīng)用。目前析浦科學(xué)儀器XEPU系列四款紫外交聯(lián)儀,xepu-1208A(365nm)、xepu-1208B(302nm)、xepu-1208C(254nm)在功能上有著諸多的優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn),比如:
◇多種模式自由選擇:自動(dòng)模式(Auto Mode)、能量模式(Energy Mode)、時(shí)間模式(Time Mode)、預(yù)設(shè)模式(Preset Mode)。
◇多種光源自由選擇:254nm(UVC)、302nm(UVB)、365nm(UVA)
◇安全性強(qiáng):儀器裝有安全聯(lián)鎖裝置,當(dāng)門(mén)打開(kāi)或者門(mén)關(guān)閉不嚴(yán)時(shí)會(huì)自動(dòng)關(guān)閉紫外光源,保護(hù)使用者安全。
◇燈管更換提示功能:當(dāng)燈管功率小于初始值的60%時(shí),此燈亮,提示用戶需要更換燈管。
◇光源分布一致性好:紫外交聯(lián)儀光源的分布,尤其是中心區(qū)域的分布一致性好,能夠保證樣品各點(diǎn)吸收的能量基本一致。
◇友好、安全的觀察窗:觀察窗采用3層特殊玻璃,用戶可以安全地通過(guò)此窗口觀察樣品和燈的運(yùn)行狀態(tài)。
◇ 預(yù)設(shè)常用實(shí)驗(yàn)程序
◇ 不同波長(zhǎng)燈管自動(dòng)識(shí)別功能
EMSA實(shí)驗(yàn)
凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)最初用于研究DNA結(jié)合蛋白,已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
紫外線誘導(dǎo)的突變
為明確紫外線對(duì)大豆疫霉菌的誘導(dǎo)突變作用?研究了紫外線誘變的突變菌株的菌落形態(tài)、菌絲生長(zhǎng)速率、菌絲形態(tài)、卵孢子形態(tài)、產(chǎn)孢能力、同宗配合能力、致病力和抗藥性的變異情況。結(jié)果表明?大豆疫霉菌突變菌株菌落形態(tài)、菌絲生長(zhǎng)速率、菌絲和卵孢子形態(tài)以及同宗配合能力都發(fā)生顯著變異?游動(dòng)孢子產(chǎn)孢量和致病性明顯降低。