熒光手電筒如何觀察熒光蛋白的熒光？

以下是觀察GFP熒光的步驟：

1. 選擇光線比較暗的環(huán)境，佩戴觀察眼罩，采用GFPfinder熒光手電筒照射要觀察的植株，GFP表達(dá)位置即可清晰呈現(xiàn)。

2. 要拍照植物GFP表達(dá)的位置，首先要有一臺(tái)單反相機(jī)，安裝植物拍照濾鏡，路徑和鏡頭要是對(duì)應(yīng)的，如果不對(duì)應(yīng)可在市場(chǎng)上購(gòu)買濾鏡安裝轉(zhuǎn)換卡，用GFPfinder熒光手電筒照射植物，用裝有濾鏡的單反相機(jī)直接拍照就行了，切記要關(guān)閉照相機(jī)閃光功能。

GFP在植物根系的表達(dá)

3. GFPfinder便攜式熒光手電筒可采用內(nèi)置有充電電池式，即開即用，可以直接帶入到試驗(yàn)田里面觀察，無(wú)需采摘葉片，如果試驗(yàn)田光線太亮，需要做隔光處理。

4. 使用450nm的藍(lán)光激發(fā)光是的，因?yàn)?88nm的激發(fā)波長(zhǎng)太接近發(fā)射波長(zhǎng)520nm，激發(fā)光和發(fā)射光距離太近對(duì)觀察眼鏡要求太高，觀察眼鏡很難把發(fā)射光隔離掉，會(huì)嚴(yán)重干擾發(fā)射的熒光。

5. 如果使用紫外光源照射葉片，葉片的葉綠素在紫外線作用下會(huì)發(fā)紅光，GFP發(fā)出的是綠色的熒光，紅色和綠色混在一起會(huì)變成黃色，所以用紫外光源照射葉片上黃色部位有可能就是GFP表達(dá)的位置。

總之，觀察GFP熒光需要選擇適合的觀察儀器和激發(fā)光源，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚砗筒僮鳎拍塬@得清晰的熒光信號(hào)。

上圖：GFPfinder-2101熒光手電筒觀察dsred在植物根系的表達(dá)