單分子熒光檢測技術(shù)是近十年來迅速發(fā)展起來的一種超靈敏的檢測技術(shù)，其檢測尺度可以精確到納米量級，是單分子檢測的方法。該檢測技術(shù)利用熒光標(biāo)記來顯示和追蹤單個分子的構(gòu)象變化、動力學(xué)、單分子之間的相互作用以及進行單分子操縱。而熒光染料作為重要的標(biāo)記物在單分子檢測中起到了舉足輕重的作用。

熒光染料，指吸收某一波長的光波后能發(fā)射出另一波長大于吸收光的光波的物質(zhì)。其作為標(biāo)記物，廣泛應(yīng)用于熒光免疫、熒光探針、細(xì)胞染色等多個方面。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。

ATTO是常見的熒光染料之一，其可作為一系列生物分子如蛋白質(zhì)和核酸的熒光標(biāo)記和分子探針，其波譜涵蓋了從紫外光到近紅外光范圍，是波段的熒光標(biāo)記。 與其他染料相比，其在紅色光譜區(qū)中擁有優(yōu)良的光穩(wěn)定性和亮度。

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熒光染料參數(shù)小知識：

1、初始亮度

是指示熒光染料的相對亮度，該值由摩爾消光系數(shù)和量子產(chǎn)率得出，這兩個參數(shù)對于每一單個熒光染料來說都是特異性的。具有較高初始亮度的熒光染料適用于檢測較低豐度的靶標(biāo)。

2、緩沖液中的光穩(wěn)定性

是初始熒光強度在經(jīng)過30秒連續(xù)照明后殘留比率的相對百分比。緩沖體系中光穩(wěn)定性較高的染料將更適合于活細(xì)胞成像和檢測等相關(guān)應(yīng)用。

3、抗淬滅劑中的光穩(wěn)定性

是初始熒光強度在經(jīng)歷30秒連續(xù)照明后殘留強度的相對百分比?？勾銣缭噭┲泄夥€(wěn)定性較高的染料更適合于固定細(xì)胞樣本的成像和檢測實驗。

4、染色指數(shù)

是一個歸一化數(shù)值，可用于比較不同熒光染料在流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用中熒光亮度的差異；該值通過使用陽性區(qū)域的平均熒光強度（MFI）減去陰性區(qū)域的平均熒光強度得到的差值，再除以兩倍的陰性區(qū)域標(biāo)準(zhǔn)差獲得。

5、激光束

表示流式細(xì)胞檢測中常用的激光束。

6、通用檢測通道

表示能夠生成成像結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡濾光片設(shè)置。

7、激發(fā)波長

表示獲得峰值的激發(fā)波長。

8、發(fā)射波長

表示獲得峰值的發(fā)射波長。